ELISA: ako sa robí analýza? Náklady. Dekódovanie výsledkov

Vysoko presné metódy analýzy sú neoddeliteľnou súčasťou modernej medicíny a predovšetkým diagnostiky. Diagnostické metódy dostupné v našej dobe umožňujú včas identifikovať nielen samotnú skutočnosť prítomnosti, ale aj počet parazitov v tele pacienta.

Teraz sa pacientom spravidla ponúka podstúpiť iba jeden test - enzýmovú imunotest.

Aplikácia krvného testu ELISA

Imunoanalýza je vysoko špecializovaný typ analýzy, ktorá sa vykonáva v laboratóriu. Analýza je založená na reakcii tela, ktorá sa bežne označuje ako „antigén-protilátka“..

Metóda analýzy založená na tomto ukazovateli poskytuje presnosť 99%. Toto je najpresnejšia metóda, ktorá je dnes známa. V praxi sa takmer nevyskytli prípady, keď by takáto analýza priniesla falošné výsledky..

Táto metóda umožňuje identifikovať:

  • značný počet infekčných chorôb spôsobených parazitmi;
  • prítomnosť rôznych typov nádorových markerov;
  • v reprodukčnej medicíne - prítomnosť bielkovín, hormónov a peptidov nevyhnutných na posúdenie plodnosti pacienta;

Spoľahlivosť výsledkov skúšky závisí od niekoľkých faktorov:

  • konkrétny druh parazita;
  • počet parazitov v tele;
  • ich miera reprodukcie.

V akých prípadoch sa používa tento typ analýzy??

Enzýmový imunotest sa široko používa pri diagnostike rôznych chorôb. Jeho hlavnou hodnotou je, že vám umožňuje presne identifikovať choroby, ktoré sú bez príznakov.

Ako viete, takéto choroby sú často problematické odhaliť v počiatočnom štádiu, a preto sa musia začať liečiť včas..

Aké choroby sú diagnostikované pomocou enzýmovej imunotesty:

  • onkologické choroby;
  • sexuálne infekcie (HIV, chlamýdie, syfilis, ureaplazmóza, herpes a iné choroby);
  • tuberkulóza, osýpky, toxoplazmóza, hepatitída atď.;
  • hormóny štítnej žľazy;
  • pohlavné hormóny;
  • rôzne autoimunitné poruchy;
  • alergické reakcie a neznášanlivosť na určité potraviny.

Na akých faktoroch je založený test ELISA?

Tento postup pomáha identifikovať:

  • infekcia tela baktériami a vírusmi;
  • bielkovinová báza;
  • helminthické invázie;
  • cudzie telesá.

Postup ELISA sa v skutočnosti skladá z dvoch častí:

  1. imunitná odpoveď;
  2. enzymatická reakcia.

Podstata princípu „antigén-protilátka“ spočíva v tom, že pôvodca choroby alebo cudzieho telesa, to znamená antigén, vstupuje do tela postupne spolu so zdrojom infekcie. Tento proces spúšťa takzvanú imunitnú reakciu určenú na ochranu tela pred cudzími prvkami..

Prejav takejto ochrany závisí od samotného antigénu a od symptómov ním spôsobenej choroby. Táto schéma sa nazýva „antigén-protilátka“.

Pre väčšiu diagnostickú spoľahlivosť sa celý postup enzýmovej imunotesty vykonáva iba v laboratóriách a lekárskych centrách. So vzorkou krvi interagujú rôzne antigény a protilátky.

Na identifikáciu typu a množstva parazitov v tele pacienta sa používa imunoglobulín triedy „A“ a „E“, ktorý reaguje na parazitické invázie.

Takáto analýza by mala odhaliť:

  • IgM;
  • IgA;
  • IgG;

Aká je imunitná odpoveď a ako sa určuje rozpoznávanie antigénu?

Imunitná odpoveď ukazuje biologické väzby v molekulách mikrobiálnych buniek, za prítomnosti ktorých sa vykonáva analýza. Imunitná odpoveď ako taká je iba jednou zo zložiek komplexného programu ELISA, zatiaľ čo druhou zložkou je enzymatická reakcia.

Rozpoznanie antigénu nastáva pri kontakte bunky imunitného systému (imunocytu) s cudzou bunkou. Jednotlivé vlastnosti antigénov slúžia ako prostriedok na rozpoznanie „priateľa alebo nepriateľa“ pre imunitný systém.

Čo sú protilátky?

Protilátka v skutočnosti:

  • Je to len molekula umiestnená na povrchu imunocytu..
  • Táto molekula sa používa na rozpoznávanie cudzích buniek..

K prenosu prijatých informácií o antigéne dochádza na bunkovej úrovni. Spojenie je zničené, ak je bunka imunná, ak nie, telo spustí prirodzenú obrannú reakciu.

Moderná veda pozná 5 tried protilátok, ktoré sa inak nazývajú imunoglobulíny alebo proteínové štruktúry.

Na označenie protilátok sa používajú latinské písmená: A, D, E, G a M..

Vo výsledkoch analýzy vyzerajú tieto označenia takto:

  • IgA;
  • IgD;
  • IgE
  • IgG;
  • IgM.

Imunologický test

Najskôr je potrebné pripraviť špeciálne polystyrénové platne, ktoré obsahujú 96 jamiek. Pred analýzou sú steny každej bunky ošetrené adsorpčným antigénom.

Krvné sérum sa nakvapká do ošetrených buniek. Homológne protilátky a antigény navzájom reagujú a vytvárajú silné väzby. Nepripojené telá sa vymyjú. Potom sa do jamiek pridajú protilátky imunoglobulínu spolu so špeciálne označenými enzýmovými prvkami.

Reagenty sú označené, aby sa uľahčila identifikácia protilátok v analyzovanom sére. Po opláchnutí sa pridá chromogénny prvok, ktorý urýchľuje reakciu a tónuje jamky. Intenzita farby v porovnaní so študovaným enzýmom ukazuje približné percento antigénu vo vzorke krvi.

Technik potom použije optickú tekutinu na:

  • zmerajte koncentráciu protilátok v jamkách;
  • porovnajte získaný výsledok s kontrolnou vzorkou, to znamená štandardom;
  • vypočítajte koncentráciu protilátok pomocou špeciálnej stupnice.

Na analýzu helminthických invázií sa používa špeciálna verzia testovacieho systému s vlastnou sadou ukazovateľov normy a odchýlok od nej.

Príprava na analýzu

Odber vzoriek krvného séra na enzýmovú imunotest sa vykonáva iba v laboratóriu. Odoberajú krv zo žily, odstraňujú odtiaľ prvky, ktoré môžu ovplyvniť proces analýzy a presnosť jej výsledkov. Ráno si urobte rozbor nalačno.

Dekódovanie výsledkov enzýmovej imunotesty

Kvalita a množstvo protilátok naznačuje prítomnosť cudzích prvkov v tele pacienta vrátane patogénov. Rovnaké znaky naznačujú, že v tele sa začal zápalový proces..

Príklad dekódovania výsledkov testu ELISA:

Štádium chorobyIgAIgMIgG
Primárne (2 týždne po infekcii)+--
Primárne (2,5 - 3 týždne od okamihu infekcie)++-
Primárne (3-4 týždne od okamihu infekcie)+++
Exacerbácia chronickej fázy (2 týždne od začiatku exacerbácie)+-+
Chronické+/--+
Minulosť (vyliečená infekcia)--+
ObnovaPo úspešnej liečbe sa titer znížil 2-4-krát-Titer klesol 4-8 krát po 1-1,5 mesiaci po úspešnej liečbe
Výsledok je negatívny---

Samotná kvantitatívna analýza uskutočnená touto metódou ešte neumožňuje presne diagnostikovať chorobu, predpísať priebeh liečby a určiť dávkovanie liekov..

Výhody a nevýhody testu ELISA

Všetky testovacie metódy, aj tie najpokročilejšie a najpresnejšie, majú bohužiaľ okrem svojich výhod aj svoje nevýhody..

Výhody enzýmovej imunotesty:

  • Špecializácia diagnostickej metódy;
  • Zvýšená citlivosť tejto metódy;
  • Aplikácia najnovších technológií.

Citlivosť diagnostickej metódy je veľká pravdepodobnosť nájdenia požadovanej metódy, aj keď je jej koncentrácia v testovacom materiáli extrémne nízka.

Špecifickosť techniky znamená:

    vysoký stupeň spoľahlivosti, to znamená, že nehrozí riziko, že dôjde k nesprávnemu výsledku. Ak je výsledok pozitívny, potom je pacientovi zaručené, že sa nájde presný typ parazita, ktorým trpí;

  • vplyv na výsledok "ľudského faktora", to znamená možných chýb laboranta, sa zníži na nulu, čo tiež prispieva k zvýšeniu presnosti.
  • Možné nevýhody tejto analytickej metódy:

    1. Predpokladá definíciu podstaty choroby, to znamená, že v tomto prípade nie je možné intuitívne „uhádnuť“ správnu diagnózu;
    2. Vysoké náklady na analýzu.

    Porovnanie duodenálneho a priameho enzýmového imunotestu

    Postup ELISA priamo využíva schopnosť protilátok nájsť antigén a vytvárať väzby so značkami. Táto metóda analýzy sa považuje za priemyselnú, čakacia doba na výsledok nie je dlhšia ako hodina.

    Po fermentácii sa objaví špeciálna značka substrátu. Hladina protilátok zodpovedá podielu antigénov v študovanom biomateriáli.

    Existuje aj duodenálna (inak - nepriama) metóda výskumu parazitických invázií, ktorá je napriek vysokej presnosti ELISA široko používaná.

    Imunotest na duodenálny (nepriamy) enzým sa uskutočňuje v 2 fázach:

    1. Najskôr sa značené protilátky porovnajú s požadovanými antigénmi;
    2. Aplikujte označené protilátky na neznačené protilátky nájdené v predchádzajúcom štádiu.

    Takto sa dosahuje dvojitá kontrola antigénov a protilátok, čo zvyšuje spoľahlivosť analýzy.

    Pri nepriamej ELISA v laboratóriu je antigén fixovaný na povrchu jamky, vytvára väzby s neznačenou časťou protilátok..

    Výhody duodenálnej metódy:

    • Dvojitá kontrola študovaného biomateriálu, čo výrazne zvyšuje presnosť;
    • Zvýšená presnosť a konkrétnosť samotnej analytickej metódy.

    Táto metóda však trvá veľa času a vyžaduje množstvo ďalších krokov. Presnosť štúdie je však taká vysoká, že oprávňuje túto nevýhodu. Z tohto dôvodu väčšina lekárov odporúča metódu duodenálnej analýzy..

    Kam ísť, ako dlho čakať a koľko zaplatiť?

    Ak máte všetko potrebné náradie a spotrebný materiál, môžete získať výsledok do 2 dní po doručení. Ak má laboratórium službu expresnej analýzy, môže byť vzorka spracovaná za 3-5 hodín.

    Kde môžem absolvovať test ELISA:

    • v štátnej klinike;
    • na súkromných klinikách.

    Ceny enzýmového imunotestu priamo závisia od cenovej hladiny na konkrétnej klinike, v priemere je jeho cena minimálne 4 000 rubľov.

    Informácie získané z tejto štúdie môžu byť užitočným prínosom pre lekárske vedy, pacient by si však mal pamätať, že keďže náklady na enzýmovú imunoanalýzu sú také vysoké, bolo by rozumnejšie zveriť tento postup spoľahlivej, časom overenej klinike..

    Vládne lekárske inštitúcie bohužiaľ nie sú vždy vybavené najnovšou vedou. Možno nebudú k dispozícii potrebné prístroje na kvalitný odber vzoriek biomateriálu a jeho spracovanie na okresnej klinike.

    Ako je teda enzýmový imunitný test užitočný pre pacienta:

    • umožňuje zistiť helminthickú inváziu v počiatočnom štádiu;
    • v dôsledku toho vám umožňuje začať liečbu včas;
    • stabilita metód umožňuje vykonať analýzu s rovnakou presnosťou u detí i dospelých.

    Enzýmový imunotest preukazuje nielen kvalitatívny, ale aj kvantitatívny faktor, to znamená, že indikuje nielen samotný fakt prítomnosti helmintov v tele pacienta, ale umožňuje aj odhadnúť ich počet..

    Imunologický krvný test s dekódovaním indikátorov

    Diagnostické metódy našej doby umožňujú identifikovať konkrétnu chorobu v laboratóriu pomocou špeciálnych testov. Jedným z nich je enzýmovo viazaný imunosorbentný test, vďaka ktorému možno potvrdiť predbežnú diagnózu..

    1. Čo je to enzýmová imunotest
    2. Čo je základom techniky
    3. Pozitívne aspekty testu ELISA
    4. Aké choroby možno zistiť pomocou testu ELISA
    5. Ako sa pripraviť na test

    Čo je to enzýmová imunotest

    ELISA je jednou z najefektívnejších a najmodernejších metód na zisťovanie infekčných chorôb, porúch spojených s imunitnými a hormonálnymi poruchami, ako aj onkologických procesov. Počas krvného testu môžu byť v krvi zistené protilátky, ktoré sa tvoria pri infekcii v tele. Vzhľadom na túto nuanciu možno chorobu zistiť už v najskoršom štádiu jej vývoja..

    Čo je základom techniky

    Výsledky analýzy ELISA sú založené na získaní chemických reakcií na enzýmy, ktoré slúžia ako špeciálne identifikačné znaky na rozpoznávanie protilátok. Preto protilátky začnú interagovať s niektorými antigénmi počas imunochemických reakcií. To všetko dáva dôvod tvrdiť, že falošné výsledky pri darovaní krvi na test ELISA sú minimálne..

    Štúdia umožňuje určiť počet imunitných buniek, ich vlastnosti, ako aj prítomnosť potrebných protilátok

    Pozitívny výsledok sa považuje za zistenie farby v roztoku. Farebné signály, ktoré antigény interagujú s protilátkou. Ak sa nič také nestane, výsledok je negatívny..

    Pozitívne aspekty testu ELISA

    Ak vezmeme do úvahy, že táto technika je založená na metóde získania imunitnej odpovede z ľudského tela, je táto metóda nepriamou diagnostickou metódou..

    Výhody enzýmového imunotestu:

    • Dostupnosť rôznych modifikácií analýzy.
    • Vysoká presnosť a vyrobiteľnosť.
    • Pravdepodobnosť chybnej analýzy je takmer nulová.
    • Používa sa na diagnostiku chorôb nielen u dospelých, ale aj u detí.
    • Všestrannosť. Odber vzoriek z analýzy vám umožňuje potvrdiť prítomnosť choroby alebo naopak vyvrátiť obavy.

    Aké choroby možno zistiť pomocou testu ELISA

    Ako bolo uvedené vyššie, pomocou analýzy môžete identifikovať rad porúch charakteristických pre prítomnosť jedného alebo druhého ochorenia. Preto veľa odborníkov predpisuje test ELISA pre väčšinu pacientov..

    K dnešnému dňu krvný test pomocou vyššie uvedenej techniky umožňuje zistiť prítomnosť mnohých infekcií uvedených v tabuľke:

    Názov chorobyPopis
    Vírusová hepatitídaIde o bežné a nebezpečné ochorenia pečene, ktoré sú zvyčajne spôsobené vírusmi..
    Dnes existuje päť druhov vírusov, ktoré môžu viesť k hepatitíde. Sú označené týmito latinskými písmenami: A, B, C, D, E.
    SyfilisToto je pohlavné ochorenie, ktoré sa dá veľmi ľahko zistiť pomocou ELISA.
    Je veľmi dôležité zistiť túto chorobu čo najrýchlejšie, aby nemala negatívny vplyv na vaše celkové zdravie..
    Cytomegalovírusová infekciaCytomegalovírus je pôvodcom choroby.
    Choroba sa môže prenášať z matky na dieťa (vo vnútri maternice), kvapkami vo vzduchu alebo sexuálnym kontaktom s nosičom. Preto je zvyčajne všetkým budúcim matkám predpísaný krvný test na test ELISA..
    HIVVírus imunodeficiencie je ochorenie, ktoré postupuje veľmi pomaly, ale napriek tomu je mimoriadne nebezpečné.
    Dôvodom je to, že vírus postupne napáda imunitné bunky, v dôsledku čoho sa organizmus stáva zraniteľným voči akýmkoľvek, aj tým najzanedbateľnejším mikróbom a baktériám..
    ChlamýdieVďaka testu imunoanalýzy viazanej na enzým je možné nielen potvrdiť prítomnosť infekcie, ale aj veľmi presne určiť hormóny, protilátky, antigény a oveľa viac, čo umožňuje vysoko kvalitnú a účinnú liečbu.
    Okrem toho analýza umožňuje čo najpresnejšie pochopiť, kedy došlo k infekcii a aké negatívne dôsledky boli v tele spôsobené chlamýdiami..
    HerpesHerpes sa môže prenášať vzdušnými kvapôčkami aj pri nechránenom pohlavnom styku. Toto ochorenie je nebezpečné, pretože negatívne ovplyvňuje prácu mnohých systémov tela..
    Vírus možno identifikovať kvalitatívne a kvantitatívne. Ak sa použije prvá metóda, potom je možné zistiť prítomnosť protilátok, typ vírusu a možnosť existencie predchádzajúcich relapsov. Pokiaľ ide o kvantitatívne, umožňuje určiť typ protilátok alebo jednoduchšie stav imunity proti vírusu.

    Berúc do úvahy skutočnosť, že detekcia choroby je možná už v počiatočnom štádiu, je možné chorobu liečiť okamžite, a preto je možné na ňu dostatočne rýchlo zabudnúť.

    Ako sa pripraviť na test

    Enzýmovo viazaný imunosorbentný test sa robí z žily, a nie z prsta, ako si niektorí myslia. Aby boli údaje správne, malo by sa dodržiavať niekoľko jednoduchých pravidiel.

    Vzorka krvi na výskum sa odoberá z kubitálnej žily

    • Pár dní pred testom nezdvíhajte ťažké predmety ani neťažte fyzicky.
    • Nepite alkohol ani nefajčite denne (nemôžete byť ani v zafajčenej miestnosti).
    • Dodržujte maximálny pokoj.
    • Testy môžete absolvovať najskôr 10 dní po užití akýchkoľvek liekov.

    Niektoré pilulky môžu ovplyvniť výsledok analýzy, takže ak nie je možné príjem zrušiť, mali by ste o tom informovať lekára.

    Niektorí odborníci tiež odporúčajú niekoľko dní pred testom podstúpiť ľahkú stravu. Ide o zdržanie sa údených, vyprážaných a slaných jedál. Ak sa daruje krv na zistenie prítomnosti hepatitídy, nemali by sa konzumovať ani citrusové plody a šťava..

    Odborníci odporúčajú niekoľko dní pred analýzou podstúpiť ľahkú stravu.

    V prípade, že je potrebné zistiť porušenie hormonálneho zázemia, môže mesačný cyklus žien ovplyvniť všeobecnú analýzu. V takom prípade sám lekár stanoví dátum, kedy bude dodanie analýzy najoptimálnejšie..

    Ďalej je uvedená tabuľka zobrazujúca zmeny normálnej hladiny luteinizačného pohlavného hormónu založené na dni menštruačného cyklu..

    Údaje o zmenách normálnej hladiny luteinizačného pohlavného hormónu sú uvedené v tabuľke

    Počet dníHladina hormónov
    1-12 dní12-14 mU / l
    12-14 deň24 - 150 mU / l
    Od 15. dňa do začiatku nového cyklu2-17 med / l

    Analýza umožňuje identifikovať rôzne typy protilátok v tele, ktoré sa prejavujú v každej fáze vývoja ochorenia. Keď sa choroba prejavila iba dobre, IgM protilátky sa aktívne produkujú. Ak sa našli, znamená to, že vznikla nejaká choroba..

    Po produkcii IgM sa začína tvorba IgG, čo naznačuje, že osoba je buď nositeľom infekcie, alebo bola nedávno chorá na niečo infekčné. IgG sa zvyčajne dá zistiť po 3 - 4 týždňoch počítaných od začiatku vývoja IgM, ale niektoré protilátky môžu byť v tele aj roky.

    Existuje tiež taká trieda protilátok ako IgA, ktorá naznačuje prítomnosť chronickej infekcie v tele. Ak sa zistí, okamžite sa začne s liečbou a potom sa opäť urobí krvný test ELISA, aby sa zabezpečilo, že liečba priniesla ovocie..

    Trochu iná situácia je u detí mladších ako jeden a pol roka, v ktorých tele sa v prvých životných fázach, aby sa zabezpečila spoľahlivá ochrana pred vírusmi, vyskytujú vo veľkom množstve protilátky IgG. Preto sa pri kontrole detí venuje hlavná pozornosť triede IgM..

    Ďalej je uvedená tabuľka, ktorá zobrazuje kombinácie prítomnosti alebo neprítomnosti infekcie.

    Tabuľka prepisov pre normy ELISA na krvné testy na prítomnosť (neprítomnosť) infekcií

    IgMIgGIgADekódovacie indikátory
    ---Žiadna imunita proti infekcii
    -+
    -Existuje postvakinálna (špecifická imunita voči infekčnému ochoreniu v dôsledku očkovania) alebo postinfekčná imunita
    +-/+-/+Akútna infekcia
    +++Exacerbácia chronickej infekcie
    -+/-+/-Máte chronickú infekciu

    Pri vyvodzovaní záverov môžeme povedať, že keď sa v tele nájdu protilátky určitého typu, potom v tabuľke vedľa hodnoty existuje znak „+“.

    Niekedy po vykonaní analýzy môže lekár predpísať ďalší, aby zistil kvantitatívny obsah látky v tele..

    Dešifrovaním testu s imunosorbentom spojeným s enzýmom by sa mal zaoberať iba odborník, ktorý porovná získané výsledky s existujúcimi príznakmi a predpíše kompetentnú liečbu.

    Analýza ELISA: čo to je? prečo je to potrebné? klady a zápory metódy

    Analýza ELISA - čo to je? Celý názov tejto diagnostickej metódy sa nazýva enzýmovo viazaný imunosorbentný test a je založený na stanovení protilátok rôznych tried alebo imunoglobulínov, ktoré sú produkované ľudským telom, v periférnej krvi..

    V praxi lekára je analýza ELISA veľmi dôležitá, keď je potrebné diagnostikovať infekčnú patológiu. Táto analýza ukazuje nielen prítomnosť infekčného ochorenia, ale aj štádium patologického procesu. Tiež nielen vo vzťahu k patogénu je indikovaná metóda ELISA: používa sa na diagnostiku alergických stavov. Tento test umožňuje identifikovať problémy v imunitnom systéme, pri mnohých ochoreniach krvotvorného systému, autoimunitných a iných poruchách.

    Prečo je potrebné IFA?

    Všetci vedci sa prikláňajú k názoru, že názov „protilátka“ je príliš nešťastný. Stále však odráža jednu dôležitú vlastnosť imunoglobulínov: sú schopné viazať a neutralizovať škodlivé látky a pristupovať k nim ako k „zámku“. Množstvo protilátok v krvi odráža nielen všeobecnú schopnosť tela brániť sa proti infekciám, ale aj schopnosť vytvárať cirkulujúce imunokomplexy, ktoré sa môžu vyskytnúť pri rôznych autoimunitných ochoreniach, napríklad pri reumatoidnej artritíde alebo pri ankylozujúcej spondylitíde..

    Komplexy protilátok s antigénom (škodlivý faktor infekčnej povahy) sú výsledkom reakcie tela na zavedenie „outsiderov“. Imunitný systém sa ich preto naučí rozpoznávať, pomocou lymfocytov trénuje imunokompetentné bunky a sú schopné produkovať vysoko špecifické protilátky. Protilátky proti vírusu Epstein sú teda usporiadané inak ako protilátky proti vírusovej hepatitíde C alebo E. coli a anti-HAV alebo protilátky proti vírusu hepatitídy A - inak ako autoprotilátky proti tkanivu chrupavky. Vďaka vysokej špecifickosti a zhode imunoglobulínov s infekčným agens je vysoko cenný taký laboratórny výskum, ako je enzýmovo viazaný imunosorbent..

    Po silnom spojení protilátok a antigénov do jedného komplexu (antigén-protilátka) škodlivé faktory strácajú schopnosť poškodiť tkanivá tela a potom sú tieto komplexy neutralizované alebo lýzované fagocytózou neutrofilmi a „trávené“ z tela odchádzajú..

    Krvný test ELISA môže ukázať, s akým špecifickým patogénnym faktorom naše telo čelí, v akom štádiu je proces interakcie medzi telom a infekciou. Po ukončení štúdie môže lekár urobiť prognózu s vysokou mierou dôvery, predpísať určité typy liečby a v niektorých prípadoch dokonca určiť dĺžku života pacienta, najmä pri chronických vírusových infekciách, napríklad pri vírusovej hepatitíde C.

    Ale v niektorých prípadoch v tele nie sú vôbec žiadne infekčné agens a protilátky „omylom“ napádajú ich vlastné orgány a tkanivá, pretože imunokompetentné bunky dostali nepravdivé informácie. Takéto choroby sa nazývajú autoimunitné a enzýmová imunotest tiež pomáha rozpoznať túto chronickú patológiu a pomáha pri diagnostike.

    Viac o imunoglobulínoch

    Ľudské telo celkovo produkuje 5 známych tried protilátok, ktoré sa označujú ako Ig (čo znamená imunoglobulíny) a ktoré patria do tried A, M, G, E a D. Všetky z nich majú veľký význam pri interpretácii výsledkov analýzy ELISA. Samozrejme, komplexov je oveľa viac a nie všetky sú stále otvorené. Ale pri diagnostike rôznych chorôb sú najcennejšie prvé tri typy protilátok. Krvný test ELISA využíva čo najviac informácií: okamih, keď sa protilátky objavia v krvi, zmena ich koncentrácie v závislosti od času, doba zmiznutia a typ špecifických protilátok.

    Účastníkmi primárneho akútneho infekčného procesu sú teda imunoglobulíny triedy M, ktoré vždy naznačujú akútnu fázu, aj keď je choroba klinicky vymazaná. Typickým príkladom je anicterická forma akútnej vírusovej hepatitídy B alebo C. Enzýmová imunoanalýza na hepatitídu ukáže, že človek má akútnu hepatitídu a príznaky ako bolesť v hypochondriu, sucho v ústach, boľavé kĺby a ďalšie nešpecifické príznaky budú ľahko pochopiteľné.

    O niekoľko týždňov neskôr sa tieto protilátky nachádzajú v čoraz miznúcej koncentrácii, ktorá vedie k imunoglobulínom triedy G. Stanovujú sa v krvi mnoho mesiacov a dokonca rokov a naznačujú buď zotavenie, ale potom môžu zostať doživotne a vytvárať silný imunitný systém. To naznačuje silnú ochranu pred patogénnymi antigénmi. Takže sú to protilátky tejto triedy, ktoré robia človeka imunným voči opakovaným prípadom antraxu a moru. Existujú však situácie, keď tieto protilátky nezabraňujú svojim škodlivým účinkom v prítomnosti antigénov. V tomto prípade môžeme hovoriť o zvýšení aktivity chronického procesu..

    Pokiaľ ide o IgE, uplatňuje sa pri diagnostike rôznych parazitárnych invázií a alergických stavov. IgD plní pomocnú funkciu: enzýmovo viazaný imunosorbentný test umožňuje jeho použitie pri komplexnej diagnostike bronchiálnej astmy a autoimunitných stavov. Dešifrovanie analýzy ELISA je samozrejme oveľa komplikovanejšie a odborníci - imunológovia môžu povedať oveľa viac. Čo naznačuje, že sa pacient môže nezávisle obrátiť na laboratórium, aby uskutočnil výskum?

    Indikácie pre analýzu

    Najskôr musíte pochopiť, že takáto analýza neexistuje - „iba krv pre ELISA“. Existuje analýza pre hepatitídu, stáva sa - pre ureaplazmu alebo pre syfilis. Darcovstvo krvi na test ELISA teda možno zacieliť iba „objednávaním“ hľadania požadovanej infekcie. Je to len také nepochopiteľné, prečo darovať krv z žily, nevediac, čo hľadať. Z tohto dôvodu je enzýmový imunotest silným nástrojom, ktorý je dôležitý pri diagnostickom výskume. Túto analýzu môže predpísať iba lekár, pretože cielene hľadá infekciu charakterizovanú týmito príznakmi. Bežný človek si, samozrejme, môže objednať 150 krvných testov metódou ELISA na „všetky infekcie“, čo by však bol neprimeraný a nákladný prístup k diagnostike, ak by sa robili testy na všetko..

    Najžiadanejšie vymenovanie týchto testov na nasledujúce choroby a stavy:

    Rôzne mikrobiálne a vírusové infekcie, príznaky infekčných chorôb - vyrážka, horúčka, žltačka, opuchnuté lymfatické uzliny, hnačkový syndróm, podozrenie na pohlavne prenosné choroby.

    Technika ELISA pomáha pri stanovení ureaplazmy a mykoplazmy, syfilisu a chlamýdií, tuberkulózy a cytomegalovírusovej infekcie, oparu, vírusovej hepatitídy a vírusu Epstein-Barr. V súčasnosti je možné pomocou enzýmového imunotestu overiť asi 500 rôznych infekcií.,

    Ak máte podozrenie na helmintickú inváziu a výskyt príznakov ako alergie, eozinofília v krvi, svrbenie, dyspepsia a strata hmotnosti,

    Prečítajte si viac o tomto type výskumu v článku „Krvný test na červy a parazity: metódy výskumu, ELISA, komu a ako darovať?“.

    Keď sa zistia alergény, ktoré spôsobujú Quinckeho edém, žihľavku, dýchavičnosť a astmatické záchvaty.

    V tomto prípade sa zistí špecifický Ig E a existujú celé panely pre alergiu, ktoré pomôžu presne určiť alergén - kalmáre alebo krevety, suché krmivo pre ryby obsahujúce dafnie, domáci prach. Pri pollinóze vám táto metóda umožňuje nájsť presne tie obilniny, kríky alebo stromy, ktoré spôsobujú jarné kýchanie a slzenie očí.,

    • Táto metóda sa zobrazuje v prípade podozrenia na autoimunitné ochorenia, ktoré liečia reumatológovia,
    • Ak existuje podozrenie na rast a aktivitu nádoru,
    • Pri komplexnej diagnostike stavov imunodeficiencie a HIV infekcie,
    • Pri ochoreniach krvi a pri transplantácii, na komplexné posúdenie imunity, napríklad pred transplantáciou pečene alebo obličiek.

    Teraz vieme, prečo musíte darovať krv na test ELISA. Zistite, ako sa uskutočňuje táto štúdia.

    Ako sa robí analýza?

    Klasickým materiálom je venózna krv pacienta. Ale ak je to potrebné, môžete preskúmať širokú škálu tekutín a tkanív: hlien, sliny, cervikálne sekréty, mozgovomiechový mok, sklovité telo oka, obsah pupočnej šnúry a plodovej vody. Je dôležité mať na pamäti, že užívanie rôznych liekov, nadmerná fyzická aktivita, zneužívanie alkoholu môžu výrazne skresliť výsledky testu..

    Existuje niekoľko metód, ktoré umožňujú túto analýzu. Najbežnejšou metódou používanou v klinických laboratóriách je fotometrická metóda. V tomto prípade sa používajú látky označené farbou, po reakcii ktorých a po označení komplexu antigén-protilátka sa zmení ich farba. Vďaka tomu sa tiež mení optická hustota roztoku a táto zmena je priamo úmerná koncentrácii detegovaných protilátok. Na meranie týchto odchýlok sa úspešne používajú laboratórne spektrofotometre.

    Pre ELISA sa tiež používa fluorometrická metóda, ktorá je založená na fluorescencii. Aj tu sa počíta intenzita fluorescenčných látok, ktoré sa usadili na študovaných vzorkách..

    Nakoniec imunologická analýza využíva elektrochemické metódy na stanovenie aktivity enzýmov, ktoré sú špecifickými značkami pre antigény a protilátky. Samotný enzýmový imunotest najčastejšie zahŕňa použitie enzýmov, ako sú alkalická fosfatáza, chrenová peroxidáza a galaktozidáza. Tieto enzýmy sú schopné viazať sa na protilátky alebo antigény a značiť ich vďaka svojej aktivite.

    Nevýhody metódy a jej klady

    Medzi zjavné „plusy“ patria demokratické náklady na analýzu, možnosť jej skríningu u veľkých skupín obyvateľstva, napríklad pri vyšetrovaní HIV na tehotné ženy. Metóda enzýmovej imunotesty je dosť špecifická a dá sa použiť na kontrolu kvality liečby mnohých chorôb. Je dôležité, aby bola analýza vypracovaná rýchlo, aby bola pre pacienta jednoduchá a bezpečná..

    Existuje však veľa nástrah. Pokiaľ teda nie sú zistené imunoglobulíny, neznamená to stopercentnú absenciu choroby. Na pozadí imunodeficiencie telo skutočne nemusí „mať silu“ syntetizovať protilátky. Ak má pacient vážne zlyhanie pečene, potom pečeň jednoducho nedokáže syntetizovať proteín, ktorý je stavebným kameňom protilátok. V tomto prípade sa výsledok nazýva séronegatívny a potvrdenie infekcie sa vyžaduje priamou a najpokročilejšou metódou výskumu - PCR alebo polymerázovou reťazovou reakciou. Na rozdiel od imunosorbentného testu viazaného na enzýmy táto metóda neodhaľuje reakciu tela na infekčný proces (ktorý môže byť chybný alebo úplne chýba), pri použití PCR sa priamo stanoví dedičný materiál alebo sa lokalizuje samotný patogén..

    Metóda enzýmového imunotestu môže poskytnúť chybu na pozadí mnohých chronických chorôb a na pozadí imunosupresívnej liečby. V helmintológii a parazitológii existuje zákon: iba detekcia parazita alebo jeho vajíčok je absolútne spoľahlivým spôsobom stanovenia diagnózy. ELISA môže poskytnúť krížové a falošne pozitívne metódy reagujúce na mnoho bežných udalostí v živote pacienta.

    Na záver je potrebné povedať, že enzýmovo viazaný imunosorbent je účinný, ale pomocný spôsob laboratórnej diagnostiky mnohých chorôb. Ale v každom prípade by diagnóza mala vychádzať z mnohých faktorov: sťažnosti a anamnéza pacienta, údaje o vyšetrení a ďalšie pomocné a inštrumentálne diagnostické metódy.

    ELISA test na koronavírus

    Od 27. marca 2020 môže byť na serveri ProfMedLab každý testovaný na COVID-19. Môžete zavolať nášho odborníka, aby vykonal analýzu doma a uzavrel s klinikou dohodu o testovaní so zamestnancami v mene právnickej osoby..
    V máji spoločnosť Profmedlab vykonala už viac ako 2 000 testov na koronavírusovú infekciu.

    Kvôli aktívnemu šíreniu koronavírusovej infekcie COVID-19 sa osobitná pozornosť venuje nielen liečbe, ale aj včasnému zisteniu tohto ochorenia. V súčasnosti väčšina lekárskych inštitúcií používa metódu PCR (polymerázová reťazová reakcia). Jeho cieľom je detekcia vírusovej RNA v epitele horných dýchacích ciest. To znamená, že ak osoba už mala koronavírusovú infekciu, potom bude výsledok PCR negatívny..

    Relatívne nedávno sa diagnóza COVID-19 začala uskutočňovať pomocou enzýmového imunotestu. Na rozdiel od PCR detekuje špecifické protilátky v krvi. To vedie k jednej dôležitej výhode metódy. S jeho pomocou môžete identifikovať nielen aktívne formy ochorenia, ale aj zistiť, či osoba mala alebo nemala koronavírus..

    Čo sú imunoglobulíny a ako súvisia s COVID-19

    Imunoglobulíny (Ig) sú špecifické proteíny, ktoré sa vylučujú bunkami imunitného systému v reakcii na prítomnosť patogénov. Hlavné funkcie imunoglobulínov sú:

    • Väzba na patogénne antigény.
    • Neutralizácia patogénu.
    • Zapojenie ďalších „zložiek“ imunitného systému do potlačenia cudzích pôvodcov.

    Existuje niekoľko tried imunoglobulínov, ale ak hovoríme o koronavírusovej infekcii (a ďalších chorobách), potom sú najzaujímavejšie dve z nich - IgG a IgM..

    Imunoglobulíny triedy M sa vyrábajú ako prvé ako reakcia na penetráciu tohto alebo toho patogénu do tela. Stanovenie týchto protilátok je preto dôležité pri diagnostike akútneho štádia ochorenia, keď je patogén v tele prítomný..

    Imunoglobulíny triedy G poskytujú ďalšiu ochranu pred opätovným vstupom patogénu. Ich maximálna koncentrácia sa pozoruje približne tri týždne po infekcii COVID-19..

    IgM teda naznačuje prítomnosť akútnej infekcie a IgG pomáha potvrdiť skutočnosť, že osoba už bola chorá..

    Vlastnosti enzýmového imunotestu

    Metóda ELISA sa vyznačuje svojou jednoduchosťou, vysokou rýchlosťou analýzy (obzvlášť dôležitá pre expresné testy) a umožňuje vám získať ďalšie informácie (osoba bola chorá alebo je stále chorá). Výskum môže byť navyše kvalitatívny alebo kvantitatívny. V prvom prípade sa zisťuje samotná skutočnosť prítomnosti špecifických imunoglobulínov a v druhom sa zisťuje ich koncentrácia, čo umožňuje nepriamo posúdiť priebeh ochorenia.

    Metóda má však určité nevýhody. Jedným z nich je relatívne nízka citlivosť a špecifickosť. To znamená, že ELISA môže poskytnúť falošne pozitívne a falošne negatívne výsledky. Okrem toho bude enzýmový imunotest neinformatívny, ak sa uskutoční v prvých dňoch po infekcii, pretože hladina imunoglobulínov stúpa do 3 - 5 dní. A konečne, ELISA vám umožňuje určiť reakciu imunitného systému na prítomnosť špecifického patogénu v tele, ale samotný patogén nemožno touto metódou zistiť..

    Preto je v niektorých prípadoch vhodné kombinovať ELISA a PCR, aby sa získali spoľahlivé a najkompletnejšie údaje o vlastnostiach priebehu koronavírusovej infekcie..

    Náklady na výskum

    Klinika ProfMedlab ponúka niekoľko typov testov na protilátky proti COVID-19:

    • Kvantifikácia imunoglobulínov triedy G. Analýza umožňuje pochopiť, či osoba prekonala koronavírusovú infekciu alebo nie. Náklady na výskum - 3200 rubľov. Materiálom pre výskum je venózna krv. Podmienky - 24 hodín.
    • Kvantitatívne stanovenie imunoglobulínov triedy G a M. Pre získanie najobjektívnejších informácií odporúčame kombinovať s PCR. Náklady na výskum - 3 900 rubľov. Materiálom pre výskum je venózna krv. Podmienky - 2-3 dni.
    • Rýchly test Protilátkový test SARS-CoV-2. Môžete to urobiť sami doma alebo na našej klinike a potom sa poraďte s lekárom. Náklady na expresný test sú 2 900 rubľov. Materiál pre výskum je kapilárna krv (z prsta). Výsledok bude hotový za 20 minút.

    Obdobie výskumnej pripravenosti je od 1 dňa od okamihu zberu materiálu. Ceny za tieto a ďalšie typy analýz sú uvedené v tabuľke:

    Názov službyCena výskumu, rub.
    Kvantitatívna analýza protilátok IgG na infekciu koronavírusom SARS-Co-V-2 pomocou testu ELISA (krvný test) na klinike.3200
    Stanovenie protilátok IgM a IgG na infekciu koronavírusom SARS-Co-V-2 pomocou testu ELISA (krvný test), na klinike3900
    Rýchly test na protilátky SARS-CoV-2 (krv), výsledok po 20 minútach2900
    PCR analýza na koronavírusovú infekciu SARS-Co-V-2 (náter), na klinike2400
    PCR analýza na koronavírusovú infekciu SARS-Co-V-2 (náter) + návšteva domu ústredného správneho obvodu3500
    PCR analýza na koronavírusovú infekciu SARS-Co-V-2 (náter) + domáca návšteva v rámci Moskovského okruhu5500
    PCR analýza na koronavírusovú infekciu SARS-Co-V-2 (náter) + výjazd do 35 km od Moskovského okruhu7000
    Stanovenie IgG protilátok proti koronavírusovej infekcii SARS-Co-V-2 pomocou testu ELISA (krvný test) - návšteva až 10 osôb.3900
    Stanovenie IgG protilátok proti koronavírusovej infekcii SARS-Co-V-2 pomocou ELISA (krvný test) - odchod 10 - 30 osôb3500
    Stanovenie IgG protilátok proti koronavírusovej infekcii SARS-Co-V-2 pomocou ELISA (krvný test) - odchod 30 - 75 osôb3200
    Stanovenie IgG protilátok proti koronavírusovej infekcii SARS-Co-V-2 pomocou ELISA (krvný test) - odchod 75 - 150 osôb3 000

    Ako objednať analýzu?

    Ak chcete vykonať analýzu, vyplňte nasledujúci formulár.

    • Výskum na COVID-19 sa nedá robiť anonymne. Nezabudnite vyplniť údaje z pasu.
    • Prihlášku je možné podať iba pre jednu osobu. Ak chce analýzu vykonať niekoľko osôb žijúcich na tej istej adrese, musí byť pre každú vyplnená žiadosť.

    Ďalšie informácie získate na telefónnom čísle: +7 (495) 308-39-92.

    Darovanie krvi pre ELISA: čo to je?

    V súčasnosti existuje veľa druhov krvných testov, pomocou ktorých môže lekár určiť zdravotný stav pacienta. Prečo je v nich analýza ELISA prioritou, prečítajte si v tomto článku.

    Krvný test ELISA

    ELISA (enzýmová imunosorbentná skúška) sa vykonáva v laboratórnych podmienkach s cieľom zistiť stupeň ochrany tela, najmä jeho funkcie. Počas tohto postupu môže špecialista určiť vlastnosti a počet buniek, ako aj prítomnosť protilátok v tele. Takéto testovanie je možné vykonať na diagnostiku autoimunitných, hematologických alebo infekčných chorôb..

    Čo je teda ELISA? Počas tohto vyšetrenia je možné zistiť protilátky v krvi. Môže sa tiež vykonať na zistenie hladiny hormónov alebo iných imunologických komplexov.

    Ak chcete vykonať takýto krvný test ELISA, musia to byť určité indície. Zvyčajne ich identifikuje lekár, ktorý vykonáva liečbu..

    Krv je možné odobrať na analýzu v týchto prípadoch:

    1. Diagnostikovať sexuálne prenosné infekcie (syfilis, chlamýdie a ďalšie).
    2. Diagnostikovať prítomnosť vírusových infekcií (hepatitída, herpes atď.).
    3. Identifikovať množstvo a kvalitu hormónov v tele.
    4. Na diagnostiku rakoviny.
    5. Na stanovenie úrovne imunodeficiencie.
    6. Diagnostikovať telo na prítomnosť určitých chorôb počas transplantácie orgánov.
    7. Posúdiť účinnosť terapie.

    Tento princíp analýzy je založený na skutočnosti, že dokáže detekovať imunoglobulíny (bielkovinové protilátky) v tele. Keď sa do tela dostane infekcia, telo vytvára také telá, konkrétne imunitný systém. Takéto látky, ktoré telo produkuje, sú schopné viazať sa na patogény a neutralizovať ich v procese..

    Klasifikácia protilátok, ktoré bojujú proti infekcii v tele

    Imunoglobulíny majú zvláštnu charakteristiku. To je špecifickosť, ktorou sa líši od iných protilátok. Vďaka tejto schopnosti sa môžu viazať na iné antigény a vytvárať tak komplexnú protilátku. Práve pri analýze ELISA je možné tieto orgány identifikovať v krvi. V súčasnosti odborníci rozlišujú medzi piatimi typmi imunoglobulínov.

    Spravidla sú rozdelené do troch tried:

    1. A.
    2. M.
    3. G.

    Takéto protilátky sa môžu hromadiť v ľudskom tele, keď sa do neho dostane infekcia. Okrem toho sa objavujú v rôznom čase po infekcii..

    Úplne prvé, ktoré sa objavia v krvi po infekcii, sú protilátky triedy M. Tvoria sa piaty deň po infekcii. Sú v tele 20 - 24 dní a potom zmiznú. Takéto protilátky môžu naznačovať, že infekcia v tele je akútna alebo už prešla do chronického štádia. Toto informuje lekára, aby okamžite zahájil proces liečby..

    Za 20 - 25 dní po nástupe infekcie sa v tele človeka objavia G telá dva roky. Ak sa pri absolvovaní testov dvakrát za sebou tieto protilátky zistia v krvi (interval medzi analýzami je 2 - 3 týždne), potom to lekárovi hovorí, že infekcia v tele sa opakuje. To znamená, že človek opäť ochorel na podobnú infekciu..

    Prečítajte si aj k téme

    Telá triedy A sa nachádzajú v tele 2 - 3 týždne po infekcii alebo exacerbácii ochorenia. Tu je potrebné poznamenať, že iba 20% týchto telies môže byť v krvi. Všetko ostatné v tomto čase bude lokalizované na slizniciach. Takéto protilátky úplne zmiznú 3 - 7 týždňov potom, čo zničia telá infekcie. Ak sa počas analýzy nenachádzajú v tele, znamená to, že v tele nie je žiadna infekcia. Ak sa tieto protilátky po určitý čas v tele stále nachádzajú, môže to znamenať, že choroba už prešla do chronickej formy.

    Na vykonanie testu ELISA sa pacientovi odoberie krv. Je tiež možné vykonať tieto štúdie a pri odbere iného materiálu, napríklad plodovej vody alebo miechy. Krv sa zvyčajne odoberá z žily na testovanie.

    Odborníci odporúčajú absolvovať tieto testy nalačno. Po jedle by malo prejsť 10-12 hodín. Rovnako, ak klient pri absolvovaní testu ELISA užíva akékoľvek lieky, musí o tom informovať svojho ošetrujúceho lekára. To môže mať vplyv na presnosť testovania. Platnosť testovania ovplyvňuje alkohol alebo drogy. Pred testovaním by sa nemali konzumovať 3 - 5 dní..

    Po preskúmaní predloženého materiálu lekár stanoví diagnózu. Môže to byť kladné (+) alebo záporné (-). Takéto hodnotenia sa uskutočňujú pre každú triedu imunoglobulínov..

    Výhody krvného testu ELISA

    Odborníci poznamenávajú, že tento typ krvných testov je dnes najbežnejší a najpopulárnejší. Oproti iným typom testovania má veľa výhod..

    Tu sú niektoré z nich:

    1. Schopnosť diagnostikovať krv v počiatočných štádiách ochorenia.
    2. Presnosť výskumu.
    3. Sledovanie trendu infekcie.
    4. Schopnosť vykonávať rozsiahly výskum, pretože úroveň zjednotenia je tu vysoká.
    5. Získanie čo najsprávnejších a najpresnejších výsledkov bude trvať málo času..
    6. Pohodlná analýza.
    7. Automatizácia niektorých procesov v laboratóriu.
    8. Nízke náklady na testovanie.

    Táto metóda diagnostiky má tiež svoje nevýhody. Medzi ne patrí skutočnosť, že výsledok testu môže byť niekedy nepravdivý. Nezáleží na tom, či je to pozitívne alebo negatívne. Takáto chyba nastane z technických dôvodov alebo porúch, ktoré môžu byť spôsobené zariadením. Nepresnosť výsledkov môže tiež závisieť od zdravotného stavu pacienta, napríklad od toho, či má chronické ochorenie alebo či užíva určité lieky.

    Je tiež potrebné poznamenať, že špecializácia lekára ovplyvňuje aj kvalitu testovania. Preto sa odporúča, aby sa všetky testy robili a vykonávali iba za prítomnosti kvalifikovaného lekára a v laboratórnych podmienkach. Ak poznáte tieto body, bude pre vás jednoduchšie urobiť správne rozhodnutie, ak potrebujete darovať krv na analýzu ELISA.

    Čo je krvný test na ELISA

    Vývoj modernej medicíny vo svete diagnostiky neprestáva udivovať jej dosiahnutými výsledkami a lekár teraz nemusí robiť domnienky o pravdepodobnej diagnóze, opiera sa iba o nepriame príznaky. Vytvorenie a zavedenie do sveta laboratórneho výskumu enzýmového imunosorbentného testu (ELISA) vám umožňuje rýchlo a presne určiť nielen prítomnosť patogénu, ale aj mnoho ďalších charakteristík choroby..

    História vzniku a vývoja IFA

    Táto metóda krvných testov sa v praktickej medicíne začala používať už v polovici minulého storočia - niekde v 60. rokoch. Jej pôvodným účelom bol vedecký výskum v oblasti histológie, ktorý sa obmedzil na hľadanie a štúdium bunkovej antigénnej štruktúry biologických druhov. Krvný test ELISA je založený na interakcii príbuzných antigénov (AG) a špecifických protilátok (AT) s tvorbou komplexu „antigén-protilátka“ stanoveného enzýmom..

    Tento jav podnietil vedcov k rozhodnutiu, že túto metódu je možné použiť na rozpoznanie proteínových zlúčenín rôznych tried, ktoré sa tvoria v krvnom sére, keď sa patogén dostane do tela. Vďaka svojej priamej účasti na fungovaní imunitného systému sa tieto zlúčeniny nazývajú imunoglobulíny (Ig, Ig) a objav bol najväčším prielomom v laboratórnej diagnostike..

    Zároveň sa táto vysoko citlivá metóda začala aktívne používať až v 80. rokoch a bola k dispozícii iba vo vysoko špecializovaných lekárskych inštitúciách. Úplne prví mohli používať analyzátory enzýmovej imunotesty na staniciach a v centrách transfúzie krvi, pohlavných a infekčných lekárskych ústavoch. Bolo to kvôli rýchlemu šíreniu „moru 20. storočia“ - AIDS, a boli potrebné urgentné diagnostické a terapeutické opatrenia..

    Možnosti techniky

    Oblasť použitia krvného testu na ELISA je dosť široká - v súčasnosti si nemožno predstaviť, aké komplikované by bolo hľadanie príčiny mnohých chorôb. Takýto výskum sa dnes používa takmer vo všetkých medicínskych odboroch, dokonca aj v onkológii. Aj keď je to pre neinformovaných ťažké pochopiť, v niektorých prípadoch bolo po jeho uskutočnení možné zachrániť životy pacientov, ktorí v počiatočných štádiách objavili nádor..

    V moderných diagnostických centrách nie sú laboratórne vyšetrenia reprezentované iba nádorovými markermi - sú vybavené pôsobivým arzenálom panelov na vykonávanie tejto diagnózy. S ich pomocou možno určiť veľa patologických stavov, ako sú hormonálne abnormality a infekčné procesy rôzneho pôvodu..

    Okrem toho vykonanie a dekódovanie krvného testu ELISA umožní sledovať účinok liekov na telo chorého človeka a dokonca aj zvieraťa. Posledná zmienka je široko používaná na veterinárnych klinikách, pomáha udržiavať zdravie našich domácich miláčikov alebo živiteľov rodiny a poskytuje stabilný prísun mäsa, mliečnych výrobkov a vajec, ktoré sú v strave nenahraditeľné..

    V dôsledku odberu iba niekoľkých mililitrov venóznej krvi a jej diagnostiky pomocou metódy ELISA bude lekár po opise výskumných materiálov schopný určiť:

    • hormonálny stav vrátane biologicky aktívnych látok pohlavných žliaz a štítnej žľazy, ako aj nadobličiek;
    • prítomnosť bakteriálnych a vírusových infekcií (hepatitída B a C, syfilis, herpes, chlamýdie, tuberkulóza, mykobunka a ureaplasmóza, HIV, TORCH) a iné choroby tohto druhu;
    • príznaky vitálnej aktivity patogénov patologického procesu, ktoré skončili zotavením a prešli do štádia tvorby protilátok (imunitná odpoveď).

    Takéto komplexy sú oveľa ľahšie rozpoznateľné a eliminované imunitnými bunkami. Zvyškové účinky vo forme protilátok sú v mnohých prípadoch obsiahnuté v krvi po celý život, čo prakticky znižuje riziko opätovnej infekcie na nulu.

    Odrody imunoglobulínov

    Existuje niekoľko typov protilátok a každá z nich sa v určitom štádiu podieľa na procese imunitnej odpovede. Napríklad imunoglobulíny triedy M (IgM) sú prvé, ktoré sa tvoria v reakcii na vstup hypertenzie do tela. Ich najvyššia miera sa pozoruje v prvých dňoch choroby..

    Potom imunitný systém vypustí do plazmy Ig triedy Ig (IgG), ktoré sú zodpovedné za úplné zničenie antigénov a zotavenie pacienta. Neskôr sú naďalej v krvi, a tým sa pripravuje imunita na opakované zasiahnutie identického patogénu. Takto funguje očkovanie. So zavedením oslabených antigénov patologických mikroorganizmov sa objavuje a zostáva v plazme veľa imunoglobulínov..

    A následne, ak dôjde k patogénnemu kontaktu, rýchlo sa vyrovnajú s infekciou a zachránia telo pred zdravotnými hrozbami. IgA je koncentrovaný vo veľkom množstve v slizniciach a blokuje vstup patogénnych vírusov a baktérií do tela. IgE sú zodpovedné za ničenie parazitárnych infekcií a na imunitnej reakcii sa podieľa aj mnoho ďalších imunoglobulínov.

    Hlavnými objektmi záujmu pre laboratórnu diagnostiku sú triedy Ig M, G a A. Podľa úrovne ich koncentrácie môžete určiť štádium ochorenia a zistiť, aké infekčné choroby mal človek v živote. Môžete napríklad skontrolovať, či sa v minulosti vyskytli kiahne alebo rubeola. Lekár, aby zistil, či je v tele pacienta prítomný určitý druh AT alebo AH, alebo či je v ňom koncentrácia nejakého hormónu, nie je potrebné predpisovať viacnásobné laboratórne vyšetrenia - stačí napísať odporúčanie na ELISA.

    Podstata techniky

    Enzýmovo viazaný imunosorbentný test na parazity a iné mikroorganizmy - škodcovia na zdraví tela umožňujú nielen zistiť prítomnosť patogénov, ale aj povedať o ich počte v krvnej plazme pacienta. Takáto štúdia teda umožňuje kvalitatívnu aj kvantitatívnu analýzu patogénnych mikroorganizmov nachádzajúcich sa v sére..

    Úroveň koncentrácie patogénu významne ovplyvňuje vývoj infekcie a rýchlosť zotavenia, preto sa kvalitatívne hodnotenie považuje za nemenej dôležité ako kvantitatívne. Pri liečbe detí a dospelých sa jej nedostáva ani zďaleka poslednej úlohy. Ako je to však možné, že ELISA je schopná rozpoznať také široké spektrum mikroorganizmov, ktoré parazitujú na tele ľudí a zvierat, spôsobujú škody a znižujú kvalitu života??

    Metodika výskumu je založená na niekoľkých možnostiach (priamych a nepriamych - konkurenčných a nekonkurenčných) plnenia zadaných úloh, pričom každá z nich je určená na konkrétne účely. Tento prístup umožňuje cielené vyhľadávanie a v čo najkratšom čase zistiť príčinu konkrétnej patológie. Na detekciu Ig rôznych tried tried sa používa 96-jamková doštička (polystyrénový panel) a v jej jamkách sa nachádzajú sorbované rekombinantné proteíny. Hrajú úlohu antigénov a v počiatočnom štádiu sú v tuhej fáze.

    Keď sa dostane do jamky s krvnou plazmou, antigény alebo protilátky identifikujú predmet v súvislosti s jeho orientáciou a tvoria komplex (AG - AT). Táto tvorba je fixovaná enzýmovou zlúčeninou (konjugát), ktorá sa následne prejaví ako zmenené sfarbenie jamky. ELISA sa vyrába na špecifických testovacích systémoch vyrábaných v špecializovaných laboratóriách a vybavených úplnou sadou reagencií.

    Túto analýzu je možné vykonať na podložkách - podložkách a údajoch spektrofotometra, ktoré však vyžadujú manuálnu prácu. Samozrejme, pre laboratórneho asistenta je niekoľkonásobne pohodlnejšie a rýchlejšie vykonávať všetky manipulácie na plne automatizovaných zariadeniach. Pri ich použití sú pracovníci laboratória zbavení veľkého množstva monotónnej činnosti - umývania, instilácie a zvyšku rutiny, ale nie všetky lekárske inštitúcie si môžu dovoliť také drahé vybavenie

    Interpretácia výskumných materiálov je výlučne v kompetencii laboratórneho diagnostika - iba jemu môžu byť povedané výsledky o špecifikách a jemnostiach priebehu ochorenia. V takom prípade musí lekár vziať do úvahy možnosť získania falošne negatívnych alebo falošne pozitívnych odpovedí..

    Dekódovanie materiálov

    Výsledkom vysoko kvalitného enzýmového imunotestu by mal byť jednoznačný záver - požadovaný mikroorganizmus sa v tejto vzorke krvi našiel alebo nenašiel. Kvantitatívna analýza ukáže hladinu koncentrácie a môže byť vyjadrená dvoma spôsobmi - hodnotou v číslach alebo počtom znamienok „+“..

    Analyzované ukazovatele

    Počas výskumu sa vykonáva dôkladná štúdia hlavných imunoglobulínov zapojených do imunitnej odpovede, ako napríklad:

    • IgM - detekcia tejto triedy znamená vývoj akútnej formy infekčného ochorenia. Negatívnym výsledkom pri hľadaní IgM môžu byť jednak dôkazy o neprítomnosti požadovaného patogénu, jednak o prechode choroby do chronického priebehu..
    • IgA - stanovenie tejto triedy pri absencii IgM vo väčšine prípadov, signál o chronickej alebo latentnej forme vývoja infekčnej choroby.
    • IgM a IgA (súčasná prítomnosť) - pozitívne výsledky pre oba typy naznačujú samotný vrchol akútnej formy patológie.
    • IgG - jeho prítomnosť naznačuje transformáciu choroby na chronickú formu alebo po zotavení a tvorbe imunity voči určenému činiteľovi.

    Vznik a akumulácia určitej triedy IS nastáva v rôznych časových fázach. Napríklad napríklad IgM sa objaví prvý, asi 5 dní po zasiahnutí patogénu. IG zostávajú v krvi asi 5-6 týždňov a potom postupne miznú. V súčasnosti sú k dispozícii na stanovenie pomocou ELISA. Približne 3 - 4 týždne po nástupe ochorenia sa objaví IgG, ktorý môže následne zostať niekoľko mesiacov. Ale v analýze sa nie vždy nájdu.

    IgA sa tvoria v krvi za obdobie 2 - 4 týždňov, pričom 20% z nich je obsiahnutých v sére a 80% z nich vylučuje sliznice. Spravidla tieto imunoglobulíny zmiznú v priebehu 2 - 9 týždňov, čo naznačuje zničenie patogénu a zotavenie pacienta. Ak ELISA stále ukazuje na prítomnosť IgA, potom to signalizuje prechod procesu do chronickej formy..

    Možnosti výsledkov analýzy

    V závislosti od získaných údajov môžu byť odpovede ELISA vydané vo formulári vo forme tabuľky s úplným zoznamom všetkých AT a AG a s uvedením pozitívnej alebo negatívnej reakcie. V určitých situáciách sa zobrazí kvantitatívna hodnota - výrazne pozitívny, pozitívny, slabo pozitívny alebo negatívny výsledok. Druhá možnosť označuje množstvo protilátok obsiahnutých v študovanej vzorke krvi.

    Okrem vyššie uvedených hodnôt sa v procese ELISA skúma ďalší kvantitatívny parameter - index avidity AT, počítaný ako percento. Ukazuje, ako dlho choroba trvá - to znamená, čím vyšší je indikátor, tým viac sa vyvinie patológia.

    Alternatívna metóda ELISA

    Enzýmovo viazaný imunosorbentný test je pomerne známa a bežná diagnóza. Možno niektorí o tom nikdy nepočuli, ale existuje iná verzia tejto štúdie, ešte menej známa širokému okruhu ľudí, v ktorej sa neodoberá krv. Táto technika sa nazýva analýza výkalov pre skrytú krv a v mnohých prípadoch vám umožňuje vyhnúť sa ďalším vyčerpávajúcim postupom, ktoré sú tiež sprevádzané nepríjemnými pocitmi..

    Test ELISA na skrytú krv (molekuly hemoglobínu) umožňuje detekovať krvácanie z tráviaceho systému, a to aj bezvýznamné, ktorého príznaky v stolici pacienta, ako sa hovorí, nemožno zistiť voľným okom. Enzýmovo viazaný imunosorbentný test v ľudských výkaloch v krátkom čase dokáže preukázať peptický vred, polypózu, divertikulózu, nádory, ktoré v počiatočných štádiách nie sú sprevádzané určitými príznakmi..

    K dnešnému dňu boli vytvorené tisíce odrôd systémov na testovanie pomocou enzýmovej imunotesty, ktoré poskytujú príležitosť nájsť AT a AG s obrovským zoznamom patológií. Preto sa táto analýza používa takmer vo všetkých odvetviach medicíny pre každú vekovú kategóriu. A absolútna neškodnosť vám umožňuje uchýliť sa k nej tak počas tehotenstva, ako aj pri diagnostike oslabených pacientov.

    Pre Viac Informácií O Cukrovke